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    生物細(xì)胞的裂解方式-培養(yǎng)細(xì)胞

    點(diǎn)擊次數(shù):1719次  更新時(shí)間:2015-05-06

    ELISA試劑盒細(xì)胞樣品:

    1. 融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的zui終濃度為1mM。
    2. 對于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞1-2秒后,細(xì)胞就會被裂解。
    對于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成50-100萬細(xì)胞/管,然后再裂解。
    3. 充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
    ELISA試劑盒裂解液用量說明:通常6孔板每孔細(xì)胞加入150微升裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到200微升或250微升。

    500mg 聚丙烯酸樹脂Ⅳ 供鑒別用 常溫,避光 190053-201001
    200mg 聚丙烯酸銨酯Ⅰ 供鑒別用 常溫,避光 190054-201001
    200mg 聚丙烯酸銨酯Ⅱ 供鑒別用 常溫,避光 190055-201001
    1ml 甲醇 供殘留溶劑檢查用 常溫,避光 130100-200901
    1ml 正丙醇 供殘留溶劑檢查用 常溫,避光 130101-200901
    1ml 異丙醇 供殘留溶劑檢查用 常溫,避光 130102-200901
    1ml 乙腈 供殘留溶劑檢查用 常溫,避光 130103-200901
    1ml 乙酸乙酯 供殘留溶劑檢查用 常溫,避光 130104-200901
    1ml 四氫呋喃 供殘留溶劑檢查用 常溫,避光 130105-200901
    1ml 乙醇 供殘留溶劑檢查用 2-8℃,避光 130106-200901
    1ml 二氯甲烷 供殘留溶劑檢查用 常溫,避光 130105-200901
    1ml 苯 供殘留溶劑檢查用 常溫,避光 130109-200901
    1ml 吡啶 供殘留溶劑檢查用 常溫,避光 130110-200901
    1ml 二甲基亞砜 供殘留溶劑檢查用 2-8℃,避光 130106-200901
    1ml 環(huán)己烷 供殘留溶劑檢查用 常溫,避光 130113-200901
    100mg 氯霉素 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130303-200614
    200mg 土霉素 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130305-200720
    200mg 四環(huán)素 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130306-200918
    200mg 紅霉素 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130307-200716
    200mg 鏈霉素 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130308-200713
    200mg 新霉素 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130309-200811
    100mg 多粘菌素B 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130313-
    ELISA試劑盒200mg 卡那霉素 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130319-200710
    100mg 桿菌肽 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130320-200709
    200mg 慶大霉素 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130326-200314
    200mg 粘菌素 效價(jià)測定 2-8℃,避光 130327-200305

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